Ortak Mikrobiyal Kültür Ortamına Giriş (I)

Ortak Mikrobiyal Kültür Ortamına Giriş (I)

Kültür ortamı, çeşitli mikroorganizmaları kültürlemek veya ayırmak için kullanılan, çeşitli mikrobiyal büyümenin ihtiyaçlarına göre çeşitli maddelerden yapay olarak hazırlanan bir tür karışık besin matrisidir.Bu nedenle besin matrisi, mikroorganizmaların kullanabileceği besinleri (karbon kaynağı, nitrojen kaynağı, enerji, inorganik tuz, büyüme faktörleri dahil) ve suyu içermelidir.Mikroorganizmaların türüne ve deneyin amacına bağlı olarak farklı kültür ortamı türleri ve hazırlama yöntemleri vardır.

Deneydeki bazı ortak kültür ortamları şu şekilde tanıtılmıştır:

Besleyici agar ortamı:

Besleyici agar ortamı, yaygın bakterilerin çoğaltılması ve kültürü, toplam bakteri sayısının belirlenmesi, bakteri türlerinin korunması ve saf kültür için kullanılır.Ana bileşenler şunlardır: sığır eti özü, maya özü, pepton, sodyum klorür, agar tozu, damıtılmış su.Pepton ve sığır eti tozu nitrojen, vitamin, amino asit ve karbon kaynakları sağlar, sodyum klorür dengeli ozmotik basıncı koruyabilir ve agar, kültür ortamının pıhtılaştırıcısıdır.

Besleyici agar, mikrobiyal büyüme için gerekli besin maddelerinin çoğunu içeren en temel kültür ortamı türüdür.Beslenme agarı rutin bakteri kültürü için kullanılabilir.

Kan agar ortamı:

Kan agar ortamı, defibrine edilmiş hayvan kanı (genellikle tavşan kanı veya koyun kanı) içeren bir tür sığır özü pepton ortamıdır.Bu nedenle bakteri yetiştirmek için gerekli olan çeşitli besinlerin yanı sıra koenzim (faktör V gibi), hem (faktör X) ve diğer özel büyüme faktörlerini de sağlayabilir.Bu nedenle kan kültürü ortamı, beslenme gerektiren bazı patojenik mikroorganizmaların yetiştirilmesi, izole edilmesi ve korunması için sıklıkla kullanılır.

Ayrıca hemoliz testi için genellikle kanlı agar kullanılır.Büyüme süreci sırasında bazı bakteriler, kırmızı kan hücrelerini parçalamak ve çözmek için hemolizin üretebilir.Kan plağı üzerinde büyüdüklerinde koloni çevresinde şeffaf veya yarı saydam hemolitik halkalar gözlemlenebilir.Birçok bakterinin patojenitesi hemolitik özelliklerle ilişkilidir.Farklı bakteriler tarafından üretilen hemolizin farklı olduğundan hemolitik kapasite de farklıdır ve kan plakasındaki hemoliz fenomeni de farklıdır.Bu nedenle bakterileri tanımlamak için hemoliz testi sıklıkla kullanılır.

TCBS ortamı:

TCBS, tiyosülfat sitrat safra tuzu sakaroz agar ortamıdır.Patojenik vibrio'nun seçici izolasyonu için.Pepton ve maya ekstraktı, bakterilerin büyümesi için gerekli olan nitrojen kaynağı, karbon kaynağı, vitaminler ve diğer büyüme faktörlerini sağlamak için kültür ortamında temel besin maddeleri olarak kullanılır;Daha yüksek sodyum klorür konsantrasyonu, vibrio'nun halofilik büyümesinin ihtiyaçlarını karşılayabilir;Fermente edilebilir karbon kaynağı olarak sükroz;Sodyum sitrat, yüksek pH'lı alkali ortam ve sodyum tiyosülfat bağırsak bakterilerinin büyümesini engeller.İnek safrası tozu ve sodyum tiyosülfat esas olarak gram-pozitif bakterilerin büyümesini engeller.Ayrıca sodyum tiyosülfat da bir kükürt kaynağı sağlar.Ferrik sitratın varlığında hidrojen sülfit bakteriler tarafından tespit edilebilir.Hidrojen sülfit üreten bakteriler varsa plaka üzerinde siyah çökelti oluşacaktır;TCBS ortamının göstergeleri, asit baz göstergeleri olan bromokrezol mavisi ve timol mavisidir.Bromokrezol mavisi, pH değişim aralığı 3,8 (sarı) ila 5,4 (mavi-yeşil) olan bir asit-baz göstergesidir.İki renk değişikliği aralığı vardır: (1) asit aralığı pH 1,2~2,8'dir, sarıdan kırmızıya değişir;(2) Alkali aralığı, sarıdan maviye değişen pH 8,0~9,6'dır.

TSA peyniri soya fasulyesi pepton agar ortamı:

TSA'nın bileşimi besin agarına benzer.Ulusal standartta genellikle ilaç endüstrisinin temiz odalarında (bölgelerinde) çöken bakterileri test etmek için kullanılır.Test edilecek alandaki test noktasını seçin, TSA plakasını açın ve test noktasına yerleştirin.Farklı zamanlarda 30 dakikadan fazla havaya maruz bırakıldığında numuneler alınacak ve daha sonra koloni sayımı için kültüre alınacaktır.Farklı temizlik seviyeleri farklı koloni sayımları gerektirir.

Mueller Hinton agar:

MH ortamı, mikroorganizmaların antibiyotiklere karşı direncini tespit etmek için kullanılan mikrobiyal bir ortamdır.Çoğu mikroorganizmanın gelişebileceği seçici olmayan bir ortamdır.Ayrıca içeriğindeki nişasta bakterilerin salgıladığı toksinleri emebildiğinden antibiyotik işleminin sonuçlarını etkilemez.MH ortamının bileşimi nispeten gevşektir, bu da antibiyotiklerin difüzyonuna elverişlidir, böylece bariz bir büyüme inhibisyon bölgesi gösterebilir.Çin'in sağlık endüstrisinde MH ortamı aynı zamanda ilaç duyarlılığı testi için de kullanılıyor.Streptococcus pneumoniae gibi bazı özel bakteriler için ilaç duyarlılığı testi yapılırken, farklı beslenme gereksinimlerini karşılamak için ortama %5 koyun kanı ve NAD eklenebilir.

SS ağarı:

SS agar genellikle Salmonella ve Shigella'nın seçici izolasyonu ve kültürü için kullanılır.Gram-pozitif bakterileri, çoğu koliformu ve proteini inhibe eder, ancak salmonella gelişimini etkilemez;Sodyum tiyosülfat ve ferrik sitrat, hidrojen sülfit oluşumunu tespit etmek için kullanılır ve koloni merkezini siyah yapar;Nötr kırmızı pH göstergesidir.Asit üreten fermente şeker kolonisi kırmızıdır ve fermente olmayan şeker kolonisi renksizdir.Salmonella, merkezi siyah olan veya olmayan, renksiz ve şeffaf bir kolonidir; Shigella ise renksiz ve şeffaf bir kolonidir.